拔除中心靜脈插管時(shí)應(yīng)嚴(yán)格遵照無菌操作的要求,包括消毒皮膚以及此后的各個(gè)步驟,以確保微生物檢驗(yàn)結(jié)果的可靠性。中心靜脈插管的許多部分均被用于診斷感染;然而,最常使用的是導(dǎo)管尖端及接頭部分(表26)。由于直至大量微生物定居于中心靜脈插管最遠(yuǎn)端后大多數(shù)CRS病例才有臨床表現(xiàn),最好使用導(dǎo)管尖端(遠(yuǎn)端的30至50mm)進(jìn)行培養(yǎng)。
定性培養(yǎng)可以提示導(dǎo)管上有何種菌落定居,但是不能區(qū)分單純的定居和真正的導(dǎo)管感染。因此,這些方法不能用于確定導(dǎo)管是否為造成全身性感染的明確原因。正因如此,定量培養(yǎng)才被用于上述鑒別診斷。Maki等建立了一種半定量培養(yǎng)方法,將導(dǎo)管遠(yuǎn)端在標(biāo)準(zhǔn)的 Petri盤(90mm)中的凝膠表面滾動(dòng),之后進(jìn)行培養(yǎng)。若培養(yǎng)結(jié)果大于或等于15cfu,則認(rèn)為高度提示導(dǎo)管感染,若菌落計(jì)數(shù)較少,則提示單純的定居。這種簡單的技術(shù)可在所有的微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行,目前已經(jīng)成為比較所有新的CRS診斷方法的參照。Maki的研究首先描述了評價(jià)導(dǎo)管相關(guān)性感染
的有效方法,盡管所采用的分界值(15cfu)僅是人為確定的導(dǎo)管形狀、大小以及制造材料,患者的情況,以及拔除導(dǎo)管時(shí)患者可能因其它原因接受抗生素治療等,都是能夠影響上述診斷標(biāo)準(zhǔn)的因素。自從1977年提出后,由于以上因素的影響,這種技術(shù)并未成為得到廣泛采用。Clei發(fā)明了一種定量培養(yǎng)技術(shù),將肉湯培養(yǎng)基沖洗導(dǎo)管腔后進(jìn)行培養(yǎng),從而使導(dǎo)管腔外培養(yǎng)與腔內(nèi)培養(yǎng)相結(jié)合。進(jìn)行操作時(shí),將待檢導(dǎo)管一段置于2ml肉湯培養(yǎng)基中,用注射器反復(fù)沖洗3次。然后將0.lml肉湯培養(yǎng)基按1:10和1:100稀釋,種植于血凝膠中。作者將>1000cfu/ml確定為導(dǎo)管感染。采用這種陽性標(biāo)準(zhǔn)診斷CRS,其敏感性為100%,特異性為95%。盡管這項(xiàng)技術(shù)較為復(fù)雜,但其優(yōu)點(diǎn)在于除腔外感染之外,還能夠發(fā)現(xiàn)通過腔內(nèi)途徑發(fā)生的感染。理論上,Maki法僅能確定經(jīng)由表皮來源,沿導(dǎo)管外部發(fā)生的感染,因?yàn)闈L動(dòng)技術(shù)只能研究導(dǎo)管的外表面。
Brun- Buisson等人描述了一種較為簡單的定量培養(yǎng)方法，他們將一段待檢導(dǎo)管置于裝有l(wèi)ml無菌蒸餾水的管中。振蕩1鐘后,取出0.1ml懸液置于血凝膠中。采用1000cfu/ml作為臨界值,這種方法對于導(dǎo)管相關(guān)性感染(CRI)診斷的敏感性為97.5%,特異性為88%,而對于導(dǎo)管相關(guān)性菌血癥(CRB)的診斷敏感性和特異性均為100%。
同時(shí)還發(fā)現(xiàn),將導(dǎo)管浸入10ml肉湯中,超聲振蕩1分鐘,然后取出0.1ml,按照1:100稀釋后并不能顯著提高上述方法的至此已經(jīng)介紹的定量培養(yǎng)方法尚無法區(qū)分導(dǎo)管相關(guān)性感染是腔內(nèi)抑或腔外途徑造成,這是因?yàn)榕囵B(yǎng)方法本身不能區(qū)分兩個(gè)表。1985年, Linares等人對Clei的定量培養(yǎng)方法進(jìn)行了改善，從而使得上述鑒別成為可能。作者用2ml培養(yǎng)基沖洗導(dǎo)管的內(nèi)表面,然后取出0.1ml逐步稀釋,進(jìn)行定量培養(yǎng)以確定腔內(nèi)定居情況。然后,按照Maki法進(jìn)行導(dǎo)管培養(yǎng),以確定導(dǎo)管腔外細(xì)菌定居情況。這種方法非常耗費(fèi)人力,但敏感性為100%,在CRI的病理生理學(xué)研究中尤其得到重視。采用這種方法,同一作者證實(shí)在CRI的發(fā)病過程中導(dǎo)管接頭受到污染的重要性。

上述診斷方法需要等待18~24小時(shí)才能得到結(jié)果?？梢詫Π纬膶?dǎo)管進(jìn)行革氏染色或丫啶橙染色,這種快速方法能夠?qū)Ω腥镜膶?dǎo)管作出早期診斷。在顯微鏡下每觀察20個(gè)視野發(fā)現(xiàn)1個(gè)微生物,即可判定為陽性。然而,快速診斷方法需要精細(xì)的判讀,敏感性和特異性都很低。而且僅可用于薄壁的透明塑料導(dǎo)管。